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流式細(xì)胞儀分選方法

更新時(shí)間:2019-09-03瀏覽:3869次

對FACSAria流式細(xì)胞儀96孔微孔板單個(gè)細(xì)胞分選方法進(jìn)行優(yōu)化和應(yīng)用作用。通過對液流的調(diào)節(jié).獲得較穩(wěn)定的分選設(shè)定值規模;在96孔微孔板蓋上分選肉眼可見液滴,確定分選液滴在96孔微孔板每孔相對應(yīng)的蓋上的位置引領;分選結(jié)束后培訓,計(jì)數(shù)單個(gè)細(xì)胞存在的細(xì)胞孔數(shù)等特點;分選細(xì)胞培養(yǎng)7d后.記錄單個(gè)細(xì)胞存在孔數(shù)及單克隆形成的數(shù)量。結(jié)果5個(gè)細(xì)胞形成的液滴即肉眼清晰可見;96微孔板有單個(gè)細(xì)胞的孔數(shù)為80~90個(gè)不合理波動,單個(gè)細(xì)胞獲得率為83.3%~93.7%,培養(yǎng)7d后大幅拓展,有活細(xì)胞存在的孔數(shù)為5~38孔助力各業,即單克隆形成率為6.3%~42.2%。分選前在96孔微孔板板蓋上分選肉眼可見液滴的簡單方法使得對液流位置的判斷直觀可見:流式細(xì)胞儀96孔微孔板單細(xì)胞分選是一種簡單易行重要工具,準(zhǔn)確有效地獲得單個(gè)細(xì)胞和單克隆的方法將進一步。

 

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