BD 流式細胞儀是集激光技術(shù)通過活化、電子物理約定管轄、光電測量、計算機及細胞熒光化學(xué)技術(shù)于一體的多參數(shù)細胞分析儀器結構不合理，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究和臨床診斷領(lǐng)域要素配置改革。其核心功能是通過液流系統(tǒng)將細胞或微粒排列成單列新型儲能，依次通過激光束檢測點空白區，利用光學(xué)系統(tǒng)激發(fā)熒光標(biāo)記物并捕獲散射光與熒光信號活動，最終通過電子系統(tǒng)將光信號轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號進行多維度分析。

　　其液流系統(tǒng)由鞘液管完成的事情、樣品管和噴嘴組成調整推進，通過流體動力學(xué)聚焦使細胞懸浮液形成直徑約3-10μm的穩(wěn)定液柱為產業發展，確保每個細胞獨立通過激光檢測區(qū)設備。光學(xué)系統(tǒng)采用氬離子激光器（488nm）或氪離子激光器（647nm），激發(fā)細胞表面或內(nèi)部的熒光染料（如FITC文化價值、PE）促進善治。前向散射光（FSC）反映細胞體積，側(cè)向散射光（SSC）揭示胞內(nèi)顆粒結(jié)構(gòu)單產提升，而熒光信號強度則對應(yīng)標(biāo)記抗原或核酸的濃度求索。光電倍增管（PMT）將光信號轉(zhuǎn)換為電脈沖，經(jīng)模數(shù)轉(zhuǎn)換后生成FCS格式數(shù)據(jù)文件多樣性。

　　BD 流式細胞儀在實驗前準(zhǔn)備：

　　1性能穩定、儀器校準(zhǔn)與質(zhì)檢

　　開機預(yù)熱：提前30分鐘開機，使激光和檢測系統(tǒng)穩(wěn)定規模。

　　光路校準(zhǔn)：使用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球（如Flow Check或CytoGlow）調(diào)整激光延遲數字化、靈敏度及PMT電壓，確保液流居中。

　　檢查背景噪聲：運行緩沖液（如PBS）開展攻關合作，確保散射光和熒光通道的基線平穩(wěn)特點，無異常信號。

　　2情況正常、樣本制備

　　細胞濃度：調(diào)整細胞濃度至5×10?~1×10?cells/mL（過高易導(dǎo)致堵塞製度保障，過低降低檢測效率）。

　　單細胞懸液：機械法（研磨）或酶消化法（如膠原酶）處理組織各領域，過濾去除團塊顯示。

　　3、染色與孵育：

　　表面抗體：4℃避光孵育15~30分鐘的有效手段，PBS洗滌后重懸模樣。

　　胞內(nèi)染色：破膜劑（如BD Fix&Perm）處理后孵育胞內(nèi)抗體。

　　活性染料：如PI（死細胞染色）或Calcein-AM（活細胞標(biāo)記）處理方法。

　　4數據顯示、對照設(shè)置：

　　空白對照：未染色的細胞用于確定熒光閾值。

　　單標(biāo)對照：單個熒光標(biāo)記的樣本用于調(diào)整補償（Compensation）服務。

　　同型對照：用于排除非特異性結(jié)合（如ISO型抗體）實現。