ND2000超微量分光光度計(jì)是一種專為微量樣本設(shè)計(jì)的分光光度計(jì)使用,可檢測(cè)低至1-2μL的核酸、蛋白質(zhì)等生物分子的濃度和純度關註點。其核心原理基于朗伯-比爾定律(A=εcl)單產提升,通過(guò)測(cè)量特定波長(zhǎng)(如DNA 260 nm、蛋白質(zhì)280 nm)的光吸收值的必然要求,計(jì)算樣本濃度的特點。其主要由光源國際要求、單色器發展成就、樣品室性能、檢測(cè)器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。光源通常采用氘燈優勢,它能發(fā)出連續(xù)的紫外光譜設計。單色器(如光柵或棱鏡)用于從光源發(fā)出的廣譜光線中選擇出單一波長(zhǎng)的光。樣品室內(nèi)放置了微量樣品池協調機製,其路徑長(zhǎng)度通常在幾毫米到幾厘米之間設備製造,以適應(yīng)微量樣品的測(cè)量需求。檢測(cè)器則負(fù)責(zé)捕捉經(jīng)過(guò)樣品吸收后的光線強(qiáng)度高質量發展,最后由數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行分析和計(jì)算資源配置。
ND2000超微量分光光度計(jì)的操作指南通常包括以下步驟:
1、儀器準(zhǔn)備
接通電源與預(yù)熱:將超微量分光光度計(jì)的電源線插好攻堅克難,打開電源開關(guān)機遇與挑戰,等待儀器軟件初始化。不同型號(hào)的儀器預(yù)熱時(shí)間可能有所不同姿勢,一般需要預(yù)熱15分鐘至30分鐘充分發揮,使其溫度穩(wěn)定服務,確保儀器處于最佳工作狀態(tài)重要平臺。
清潔樣品池:檢查樣品池是否干凈,如有污染或殘留液體選擇適用,需用適當(dāng)?shù)娜軇ㄈ?0%乙醇)輕輕擦拭干凈生動,并用無(wú)塵紙擦干。注意避免刮傷樣品池表面核心技術。
儀器校準(zhǔn):使用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行儀器校準(zhǔn)綠色化,校準(zhǔn)操作根據(jù)儀器型號(hào)可能有所差異,請(qǐng)參考儀器說(shuō)明書創新能力。這一步是為了確保測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性至關重要。
2、設(shè)置測(cè)量參數(shù)
選擇測(cè)量波長(zhǎng):根據(jù)待測(cè)物質(zhì)的特性和實(shí)驗(yàn)要求發展,選擇合適的測(cè)量波長(zhǎng)改進措施。不同的物質(zhì)在特定波長(zhǎng)下有最大吸收峰,選擇該波長(zhǎng)可以獲得最佳的測(cè)量靈敏度和準(zhǔn)確性效果。例如發展的關鍵,對(duì)于DNA的測(cè)量,通常選擇260nm和280nm的波長(zhǎng)。
確定光程長(zhǎng)度:光程長(zhǎng)度是指光線通過(guò)樣品的距離有所應,一般為1cm道路。但部分超微量分光光度計(jì)的光程較短,如0.5mm今年、1mm等空間廣闊,具體需根據(jù)儀器型號(hào)和樣品特性來(lái)確定。
設(shè)定測(cè)量模式:常見的測(cè)量模式有吸光度模式傳承、濃度模式貢獻力量、透過(guò)率模式等。吸光度模式用于直接測(cè)量樣品的吸光度值具有重要意義;濃度模式可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線自動(dòng)計(jì)算樣品的濃度前景;透過(guò)率模式則用于測(cè)量樣品的透光率。用戶需根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜆悠非闆r選擇合適的測(cè)量模式勃勃生機。
3進一步、樣品測(cè)量
空白對(duì)照調(diào)零:在進(jìn)行樣品測(cè)量之前,通常需要進(jìn)行空白對(duì)照調(diào)零多種,以消除溶劑發行速度、比色皿等因素對(duì)測(cè)量結(jié)果的影響。取適量的空白溶劑(如蒸餾水強大的功能、緩沖液等)積極拓展新的領域,加到檢測(cè)基座上,放下樣品臂與時俱進,浸泡一段時(shí)間(如2-3分鐘)應用,然后用無(wú)塵紙將檢測(cè)基座擦拭干凈。之后點(diǎn)擊調(diào)零按鈕更優質,使儀器以空白溶劑為空白對(duì)照進(jìn)行調(diào)零成就。
加入樣品:將待測(cè)樣品用移液器吸取適量,加到檢測(cè)基座上項目。注意加樣時(shí)要緩慢相對開放、準(zhǔn)確,避免產(chǎn)生氣泡或溢出綜合運用。對(duì)于一些需要稀釋的樣品相貫通,應(yīng)先進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屘幚恚蛊錆舛仍趦x器的線性范圍內(nèi)脫穎而出。
開始測(cè)量:放下樣品臂系統,使樣品與檢測(cè)基座充分接觸。然后點(diǎn)擊測(cè)量按鈕,儀器將自動(dòng)記錄并顯示樣品的吸光度值重要的作用、濃度或其他相關(guān)參數(shù)資料。測(cè)量完成后,屏幕會(huì)顯示測(cè)量結(jié)果重要的意義,包括吸光度方式之一、濃度、A260/A280比值等信息深刻認識。
4首要任務、數(shù)據(jù)處理與記錄
查看結(jié)果:測(cè)量完成后,仔細(xì)查看儀器顯示的測(cè)量結(jié)果新型儲能,確認(rèn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性深入實施。如果需要進(jìn)行多次測(cè)量,可以記錄每次的測(cè)量結(jié)果不同需求,并計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)差業務指導。
保存數(shù)據(jù):將測(cè)量結(jié)果保存到計(jì)算機(jī)或打印機(jī)中,以便后續(xù)分析和處理發展空間撛煨??梢允褂脙x器自帶的軟件或第三方軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析。