基本PCR運行可以分為三個階段:指數(shù)期全面展示、線性期和平臺期敢於挑戰,熒光定量PCR儀主要是在發(fā)生PCR擴增時進行測量增產。一般為定量長效機製,因為在PCR的指數(shù)(對數(shù))期內(nèi)采集數(shù)據(jù),在此期間PCR產(chǎn)物的數(shù)量與核酸模板的量成正比引人註目。
熒光定量PCR儀的應(yīng)用十分廣泛關註,可以進行基因表達定量、芯片驗證拓展、病原體檢測提供堅實支撐、SNP基因分型、拷貝數(shù)變異、microRNA分析創造更多、病毒定量、siRNA/RNAi實驗多種方向的研究測量好宣講。

1連日來、提高檢測的動態(tài)范圍
2、無需PCR后處理
3不斷進步、檢測能夠覆蓋低至2倍的變化
4流程、在PCR的指數(shù)期內(nèi)采集數(shù)據(jù)
5、報告基團熒光信號的增加與生成的擴增子數(shù)量成正比
6培訓、裂解探針提供擴增子的裂解記錄
熒光定量PCR儀集中于指數(shù)期等特點,因為它可提供更加精確的數(shù)據(jù)進行定量。在指數(shù)期內(nèi),實時計算兩個數(shù)值不合理波動。閾值線是反應(yīng)的熒光強度超過背景時的檢測水平。樣品達到此水平的PCR循環(huán)稱為循環(huán)閾值(Ct)大幅拓展。Ct值用于下游定量或存在/缺失檢測助力各業。通過比較未知濃度的樣品與一系列標準品的Ct值,可以精確測定未知反應(yīng)中的模板DNA數(shù)量效高。