簡介
 

　　古語說：“工欲善其事取得顯著成效，必先利其器”基地。要想很好地應用流式細胞分析和分選技術今年，必需先對儀器進行調試積極性，使其處于良好的工作狀態(tài)，并能正確使用儀器線上線下。下面簡要介紹細胞計的調試項目及要點保供、使用的程序等等。
 

　　調試和校準
 

　　流式細胞儀在使用前知識和技能，甚至在使用過程中都要精心進行調試技術創新，以保證工作的可靠性。調試的項目主要是激光強度進行部署、液流速度和測量區(qū)的光路等生產體系。
 

　　激光強度：除調整反射鏡的角度以調整到所需波長的激光出光外，還要結合顯示屏上的光譜曲線使激光的強度輸出為大重要作用。
 

　　液流速度：可通過操作臺數字顯示監(jiān)督高質量，調節(jié)　氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。
 

　　測量區(qū)光路調節(jié)『苤匾?。哼@是調試工作的關鍵。需要保證在測量區(qū)的液流、激光束保護好、90散射測量光電系統垂直正交能力和水平，而且交點較小。一般可在用標準熒光微球等校準中完成充足。
 

　　流式細胞術中所測得的量是相對值註入了新的力量，因此需要在使用前或使用中對系統進行校準或標定，這樣才能通過相對測量獲得的意義堅實基礎。因而FCM中的校準具有雙重功能：儀器的準直調整和定量標度積極。標準樣品應該穩(wěn)定大數據，有形成份形狀應是大小比較一致球形，樣品分散性能良好經驗，且經濟、容易獲得。常用標準熒光微球作為非生物學標準樣品進一步意見，雞血紅細胞做為生物學標準樣品組成部分。微球用樹脂材料制作，或標有熒光素集聚，或不標記熒光素。所用的雞血紅細胞標準樣品制作過程昭下：取3.8%枸櫞酸或肝素抗凝的雞血(抗凝劑：雞血=1：4)大大提高，經PBS清洗3次新的動力，再用5～10ml的1.0%戊二醛與清洗后的雞紅細胞混合，室溫下振蕩醛化24h調整推進，后經PBS再清洗為產業發展，貯4℃冰箱中備用。需要指出的是因為未經熒光染色發展契機，所測光信號為雞血紅蛋白的自發(fā)熒光穩定。
 

　　儀器的操作和使用
 

　　①打開電源齊全，對系統進行預熱廣泛關註；
 

　　②打開氣體閾機製，調節(jié)　壓力各項要求，獲得適宜的液流速度；開啟光源冷卻系統發力；
 

　瀯菖c挑戰、墼跇悠饭苤屑尤肴ルx子水，沖洗液流的噴嘴系統越來越重要的位置；
 

　栴}分析、芾眯蕵藴蕵悠罚{整儀器解決方案，使在激光功率不負眾望、光電倍增管電壓、放大器電路增益調定的基礎上切實把製度，0和90散射的熒光強度優化上下，并要求變異系數為小最新；
 

　“l揮重要作用、葸x定流速自行開發、測量細胞數、測量參數等取得顯著成效，在同樣的工作條件下測量樣品和對照樣品處理方法；同時選擇計算機屏上數據的顯示方式，從而能直觀掌握測量進程責任；
 

　》?、迾悠窚y量完畢后，再用去離子水沖洗液流系統持續向好；
 

　∨e行、咭驗閷嶒灁祿汛嫒胗嬎銠C硬盤(有的機器還備有光盤系統，存貯量更大)不容忽視，因此可關閉氣體習慣、測量裝置，而單獨使用計算機進行數據處理組建；
 

　「采w、鄬⑺杞Y果打印出來。
 

　　操作和使用中的注意事項
 

　　1)光電倍增管要求穩(wěn)定的工作條件進展情況，暴露的較強的光線下以后重要的作用，需要較長時間的“暗適應”以消除或降低部分暗電流本底才能工作；另外還要注意磁屏蔽研究；
 

　　2)光源不得在短時間內(一般要1h左右)關上又打開搶抓機遇；使用光源必須預熱并注意冷卻系統工作是否正常；
 

　　3)液流系統必需隨時保持液流暢通特點，避免氣泡栓塞相互配合，所使用的鞘流液使用前要經過過濾、消毒品質；
 

　　4)注意根據測量對象的變換選用合適的濾片系統積極回應、放大器的類型等；
 

　　5)特別強調每次測量都需要對照組相關性。