一關規定、BD流式細胞儀的檢測范圍
1.流式細胞儀可以檢測細胞結構顯示,包括:細胞大小研究、細胞粒度要求、細胞表面面積更加堅強、核漿比例提供有力支撐、DNA含量與細胞周期、R NA 含量配套設備、蛋白質(zhì)含量發展成就。
2.流式細胞儀可以檢測細胞功能,包括:細胞表面/ 胞漿/ 核的特異性抗原建議、細胞活性優勢、細胞內(nèi)細胞因子、酶活性、激素結合位點和細胞受體品率。
二、BD流式細胞儀的臨床應用
1.流式細胞術在腫瘤學中的應用:流式細胞術可以檢測腫瘤細胞增殖周期推進高水平、檢測腫瘤細胞表面標記開展面對面、癌基因表達產(chǎn)物、進行多藥耐藥性分析不斷發展、檢測凋亡;2.流式細胞術在血液學中的應用:檢測白血病和淋巴瘤細胞便利性、活化血小板、造血干細胞(CD34+)計數(shù)非常重要、白血病與淋巴瘤的免疫分型實事求是、網(wǎng)織紅細胞計數(shù)、細胞移植的交叉配型和免疫狀態(tài)監(jiān)測;3.流式細胞術在免疫學中的應用:可以進行淋巴細胞及其亞群分析行動力、淋巴細胞免疫分型結構、檢測細胞因子。
三落到實處、BD流式細胞儀的科研應用
主要有細胞動力學功能研究情況、環(huán)境微生物分析、流式細胞術與分子生物學研究高品質。
四等多個領域、流式細胞術常規(guī)檢測時的樣品制備
(一) 直接免疫熒光標記法
取一定量細胞(約1 × 106 細胞/ml ),直接加入連接有熒光素的抗體進行免疫標記反應(如做雙標或多標染色創新能力,可把幾種標記有不同熒光素的抗體同時加入)至關重要,孵育20-60分鐘后主動性,用PBS(pH7.2 - 7.4)洗1-2 次,加入緩沖液重懸改進措施,上機檢測範圍。本方法操作簡便,結果準確發展的關鍵,易于分析,適用于同一細胞群多參數(shù)同時測定。雖然直標抗體試劑成本較高有所應,但減少了間接標記法中較強的非特異熒光的干擾道路,因此更適用于臨床標本的檢測。
(二) 間接免疫熒光標記法
取一定量的細胞懸液(約1X106 細胞/ml )今年,先加入特異的*抗體空間廣闊,待反應*后洗去未結合抗體,再加入熒光標記的第二抗體真諦所在,生成抗原-抗體-抗抗體復合物研學體驗,以FCM檢測其上標記的熒光素被激發(fā)后發(fā)出的熒光。本方法費用較低提供深度撮合服務,二抗應用廣泛深刻內涵,多用于科研標本的檢測。但由于二抗一般為多克隆抗體最為突出,特異性較差逐步顯現,非特異性熒光背景較強,易影響實驗結果。所以標本制備時應加入陰性或陽性對照近年來。
另外,由于間標法步驟較多事關全面,增加了細胞的丟失交流等,不適用測定細胞數(shù)較少的標本。